威尼斯人登录网址载体

威尼斯人登录网址（Lentiviruses）属于逆转录病毒科。威尼斯人登录网址核蛋白质前整合复合物具有噬核特性，病毒基因组运输至细胞核，从而使威尼斯人登录网址可以感染和在非有丝分裂细胞中复制。这一特性使威尼斯人登录网址成为基因治疗的转移载体。 HIV （Human immunodeficiency virus） 、EIAV （Equine infectious anemia virus） 、 FIV （Feline immunodeficiency virus） 、 SIV （Simian immunodeficiency virus） 。其中研究最多最为透彻的是HIV。
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重组威尼斯人登录网址的产生：瞬时转染法，即将包装结构和载体结构瞬时共转染法如293T 高表达细胞系而产生重组威尼斯人登录网址。此法非常成功，大多实验室采用此法。包膜质粒、包装质粒与载体质粒共转(多用磷酸钙共沉淀法)染293T细胞直接产生生产细胞。最后重组威尼斯人登录网址分泌到培养基中进行培养而得到大量载体威尼斯人登录网址。

威尼斯人登录网址包装实验流程如下：

lentivirus packing_1

1.根据目的基因相关信息（序列，基因序列号等）获取目的基因；

2.根据客户要求选择对应载体；

3. 将目的基因构建到威尼斯人登录网址载体获得含有目的基因的重组载体；

4. 测序鉴定重组质粒，高纯化（不含内毒素）提取的重组质粒；

5. 使用高纯提重组载体和威尼斯人登录网址包装质粒共转染293FT 细胞，进行病毒包装并收集上清液；

6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒；

7. 使用病毒液感染293T细胞，药物筛选细胞，构建稳定表达细胞系。